[00971096]Bt杀蚊沉默基因的克隆和新型杀蚊工程菌的构建
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苏云金杆菌以色列亚种和球形芽胞杆菌是目前应用最为广泛的杀蚊细菌，野生菌株在杀蚊谱，持效性和抗性产生等方面各有不足。本研究将苏云金杆菌以色列亚种(简称Bti)的杀蚊毒素基因cry4Ba和cry11Aa与球形芽胞杆菌(简称Bs)的二元毒素基因btx (binary toxin gene)两种杀蚊菌的杀蚊毒素基因进行了重组，将Bti杀蚊毒素基因cry4Aa，cry4Ba，cry11Aa及Bs的杀蚊毒素基因btx单独或组合表达，所得工程菌株对敏感和抗性库蚊的毒力均有提高，不仅提高了杀蚊毒力，扩大了杀蚊谱，而且部分克服了蚊幼虫对Bs的抗性。另外，从苏云金杆菌野生株中克隆到一新的杀蚊毒素基因cyt2Ba7，其表达产物对昆虫细胞也具有溶细胞活性。在E.coli中表达完整的cyt2Ba7和其3端截短的基因，发现该蛋白的C末端15个氨基酸具有保护蛋白不被降解，降低其对宿主毒性的功能。