[00957745]微生物发酵法制备凝乳酶中试生产工艺的研究

项目所取得的成果：该项目就是在前期工作的基础上,研究印度毛霉发酵法制备凝乳酶中试生产的工艺.通过对中试生产工艺、酶的分离纯化及干燥方法的研究,制备了一些列不同纯度的凝乳酶.通过该研究对印度毛霉MJ229的工业化生产过程进行探索,为实现凝乳酶的工业化生产奠定基础。

项目主要创新点：利用江米酒酒醪中分离得到的印度毛霉制备凝乳酶,在中国及世界上都是首次报道,丰富了产酶微生物资源,补充了依靠以动物雏胃制备凝乳酶的不足.采用固态发酵方法,通过种子培养、托盘培养,曲培逐级放大的方式进行印度毛霉MJ229的发酵,对发酵后的曲料经过浸提、中空纤维超滤浓缩、离子交换或凝胶层析等手段进行分离纯化,最后经过真空干燥或喷雾干燥法制备了从1.02*104到2.79*105U/g纯度不同的凝乳酶制剂.应用试验表明,该工艺制备的凝乳酶活力高,稳定性好.通过微生物发酵代谢理论分析与试验过程控制,建立了印度毛霉固态发酵动力学模型。

经济效益：该课题所制备的凝乳酶凝乳活力高,凝乳性能良好,能够被广泛应用于干酪生产中,为皱胃酶找到一个新的来源,从一定程度上缓解了凝乳酶供不应及的状况,为中国干酪工业的顺利发展奠定了坚实的基础,为干酪产业的发展做出了贡献.制备一千克酶制剂的成本为166元,若所获得的酶制剂单价为300元/kg,制备1吨酶制剂的销售额为30万元,凝乳酶及其相关产品预计将为企业带来显著的经济效益。

社会效益：通过该课题建立一套完整的利用微生物进行固态发酵制备酶制剂的工艺流程.包括霉菌固态发酵、分离、提取、纯化、精制、干燥等制备凝乳酶的过程,建立了相关的工艺参数,为其他的酶类及蛋白质的提取、纯化及制备提供了借鉴.与此同时,一批具有微生物、生物化学、发酵工程专业知识和技能的博士生、硕士生参与到该课题的研究中,在课题研究中提升了技术理论。