[00796434]MenPS-EA偶联物的制备及其在荚膜多糖抗体检测中的应用
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所属行业:
其他医药与医疗
类型:
非专利
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技术详细介绍
该研究将脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖与卵清蛋白偶联(MenPS-EA),藉蛋白为桥梁将荚膜多糖固相化于聚苯乙烯板,大大增加了吸附力,建立了稳定的检测抗荚膜多糖IgG抗体的间接ELISA法。其技术创新点为:(1)偶联物经SepharoseCL-4B纯化,并利用高效液相色谱(HPLC)对大分子物质纯度进行了测定,获得了高纯度(81.5%)的多糖-蛋白偶联物。(2)藉蛋白为桥梁将荚膜多糖固相化于聚苯乙烯板,大大增加聚苯乙烯板的吸附力,克服了单纯荚膜多糖与常用的聚苯乙烯板的结合力较弱,造成试剂稳定性差的缺点。(3)对试剂进行了全面考核,将试剂盒4℃放置1、3、6、9、12个月,37℃放置3天、7天,试剂具有优良的稳定性。(4)将试剂与SBA比较,其灵敏度为96.91%,特异度为90.00%,一致性为95.83%,统计学分析表明两种检测方法之间无显著性差异。该研究可为基础研究、临床检验、大面积人群血清流行病学调查提供可借鉴的方法,也为进一步研究及开发细菌多糖类抗体诊断试剂提供了新的思路。具有广阔的应用前景。
该研究将脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖与卵清蛋白偶联(MenPS-EA),藉蛋白为桥梁将荚膜多糖固相化于聚苯乙烯板,大大增加了吸附力,建立了稳定的检测抗荚膜多糖IgG抗体的间接ELISA法。其技术创新点为:(1)偶联物经SepharoseCL-4B纯化,并利用高效液相色谱(HPLC)对大分子物质纯度进行了测定,获得了高纯度(81.5%)的多糖-蛋白偶联物。(2)藉蛋白为桥梁将荚膜多糖固相化于聚苯乙烯板,大大增加聚苯乙烯板的吸附力,克服了单纯荚膜多糖与常用的聚苯乙烯板的结合力较弱,造成试剂稳定性差的缺点。(3)对试剂进行了全面考核,将试剂盒4℃放置1、3、6、9、12个月,37℃放置3天、7天,试剂具有优良的稳定性。(4)将试剂与SBA比较,其灵敏度为96.91%,特异度为90.00%,一致性为95.83%,统计学分析表明两种检测方法之间无显著性差异。该研究可为基础研究、临床检验、大面积人群血清流行病学调查提供可借鉴的方法,也为进一步研究及开发细菌多糖类抗体诊断试剂提供了新的思路。具有广阔的应用前景。