[00782217]一类新药重组人酸性成纤维细胞生长因子的开发与应用

应用领域和技术原理：该成果属于生物工程领域。主要是采用基因重组人酸性成纤维细胞生长因子(raFGF)多方面多层次研制开发，成为基因工程一类新药，生物制品，保健品和美容护肤品等，其涉及的技术主要为基因工程上下游技术。技术原理：1、研制技术上：(1)采用基因工程方法，克隆了haFGF基因，并通过大肠杆菌高效表达后，采用高密度发酵，经过离子交换、亲和、排阻等层析纯化方法，获得纯度和活性极高的rhaFGF原液；(2)基于rhaFGF蛋白分子结构，采用定点突变和化学修饰技术对其结构改造，研究其结构与功能关系；(3)通过药物安全性评价、临床试验和外用rhaFGF的药理药效学研究，阐明了rhaFGF临床应用的安全、有效和剂量效应关系。2、生产开发上：(1)利用其独特的保存性质，选择合适保护剂，制成冻干制剂或添加到保健品、护肤品中；(2) 根据不同剂型的要求，利用生物技术与材料学交叉，研究rhaFGF凝胶、喷雾、滴眼剂等新型生物功能制剂。性能指标：1、rhaFGF表达量为208mg/L、纯度达到99.9%(HPLC)、比活性为2.5×105IU/mg；2、经过结构修饰的PEG-aFGF修饰率超过了50%，纯度达到99%(HPLC)，比活性为修饰前野生型aFGF的53%。3、非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)改构体工程菌连续传代50次，产物表达水平稳定，保持在20%以上，纯度达95%以上(HPLC)，其促细胞分裂作用基本消失，但保留了很好的神经修复及抗氧化作用等非促分裂活性。4、围绕相关技术及产品申请发明专利7项，获授权2项；5、获一类新药证书1个：外用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)冻干粉<国药证字S20060078>；6、完成改构体nmhaFGF临床前研究，正申报一类新药临床批文；与国内外同类技术比较：(1)通过对aFGF实施聚乙二醇(PEG)定点化学修饰，获得了稳定性和安全性好的新型蛋白药物，且活性保存率达到53%，远高于国内外重组蛋白经化学修饰后活性保存率的均值(30%左右)(化学通报，2004)；(2)成功构建了能高效稳定表达rhaFGF的工程菌株，其表达量达到20%，且在分离发酵过程中保持良好的遗传稳定性，为rhaFGF的规模化生产打下了坚实基础。(3)建立改良的二步提纯工艺，使药物纯度达到99.9%，高于Promeaga和Sigm等国际知名试剂公司纯品的纯度。(4)首次在国内开展外用FGFs的临床药理研究。迄今累计观察临床病例达1000多例。研究观察病例涉及大面积烧伤、慢性难愈合创面(如糖尿病病人的慢性创面、褥疮、瘘道、慢性溃疡)、慢性肉芽创面以及整形手术后创伤愈合等。研究结果表明，aFGF对上述适应症具有显著疗效，是疗效突出的促创面愈合新药之一。成果的创造性、先进性：(1)构建了19位末端缺失的稳定型人源aFGF结构体(rhaFGF)；率先在国际完成国家生物制品一类新药人源aFGF临床前研究工作，获得了国家食品药品监督管理局的新药证书(国药证字：S20060078)。(2)定向去除野生型aFGF的核转位功能区，表达出新型非促分裂aFGF改构体MaFGF(Protein expression and purification，2005)，完成了MaFGF一类新药的中试以及临床前研究。(3)采用融合型表达体系，使外源表达产物能在菌体蛋白的引导下形成较好的杂合折叠构象，封闭了部分重组蛋白上的酶切敏感部位，增强了抗酶解能力，提高了蛋白稳定性(Protein&Peptide Letters，2005)。(4)aFGF是中国具有自主知识产权的又一个基因工程一类新药，其外用产品已获得国家一类新药证书，临床试验结果表明：具有很好的安全性和有效性。作用意义(直接经济效益和社会意义)：直接经济效益：rhaFGF主要作为药物和化妆品，供医院、美容院或消费者家庭使用。到目前为止，rhaFGF的相关专利技术产品累计产值已超过1亿元。社会意义：(1)rhaFGF给创伤修复学、烧伤学赋予新的用药概念，改变传统仅用抗感染药被动治疗的观念；rhaFGF为慢性瘘道、慢性糖尿病溃疡等无法很好解决的外科疾病提供新的治疗方法，为病人及时解决了痛苦。rhaFGF药物的上市，将大大缩短了病人的治疗周期，减轻了病人的痛苦。(2)rhaFGF对换肤术、纹眉、纹眼线、去眼袋等造成局部创伤的表皮组织可以快速的修复，促进细胞生长。aFGF系列化妆品对促进皮下毛细血管发育，改善肤色，促进表皮细胞更新，改善皮肤具有良好的效果，受到广大消费者的欢迎，该产品已遍布全国28个省、市、自治区，经济和社会效益不断递增。(3)该项目产品是高技术，属于国家基因工程一类新药，该产品的研制成功和实现产业化，在缩小中国在生物医药领域与发达国家的差距以及对二十一世纪中国人民医疗保健水平的提高均具有重要的意义。