[00696727]无胶原酶蛋白酶的开发和中试应用
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技术详细介绍
该项成果的核心内容是选育或构建具有良好脱毛效果，且胶原水解活性低的微生物菌株，取得的主要进展是：利用平板筛选法、蛋白酶活性测定法、SDS-PAGE分析法和脱毛实验等四种方法相结合的方法，筛选到一株蛋白酶活性为500u/mL、具有很好脱毛效果但具有胶原酶活性且短小的芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。对该菌进行多轮诱变处理，获得一株蛋白酶活性可达到5500u/mL，最高可达7000U/mL，发酵周期36-44h；中试发酵液经过板框或离心沉淀，上清液经硫酸铵沉淀，同时具有蛋白酶活性和脱毛活性的蛋白酶可用65％饱和度的硫酸铵沉淀，其回收率可达95％以上，粗酶制剂的总回收率可达67％，其比活性为47973U/g；当把发酵液直接用硫酸铵沉淀，真空干燥沉淀物后的回收率可达79.6％，粗酶制剂的比活性为43430U/g。粗酶制剂具有较好的稳定性；中试发酵液对猪皮、同羊皮、绵羊皮和牛皮均具有良好的脱毛脱果，对两种关皮和牛皮的脱毛效果尤佳。