[00362523]鸡主要感染性疾病防控关键技术与应用

鸡感染性疾病是严重危害养鸡业的主要疾病，此类疾病的控制主要依赖化学药物，但药物的使用易产生耐药性和药物残留。因此，鸡感染性疾病的免疫预防、中药防治技术的应用、开发新型高效动物专用抗感染药物势在必行。该项目将危害鸡健康的鸡球虫、沙门氏菌病、传染性支气管炎、住白细胞虫病为重点研究内容，研制出富于创新的“鸡主要感染性疾病防控关键技术与应用”成果，为鸡病防治提供新技术。 主要技术内容及创新点： 1.采用SOE-PCR技术构建鸡堆型艾美耳球虫裂殖子单链抗体可变区全套基因文库，为单链抗体噬菌体抗体库的构建提供基础。 2.构建鸡堆型艾美耳球虫裂殖子单链抗体噬菌体抗体库，富集筛选噬菌体单链抗体，鉴别单链抗体对裂殖子抗原的识别位点，为鸡球虫病的免疫控制提供新的工具。 3.构建保定株鸡堆型艾美耳球虫pcDNA3-3-1E重组表达质粒，裸质粒免疫雏鸡诱导免疫反应，产生抗球虫效果，为研制DNA疫苗提供基础。 4.pcDNA3-1E质粒的生物安全性研究，pcDNA3-1E免疫雏鸡，质粒DNA未整合入宿主细胞基因组以及转化环境细菌，急性毒性试验无明显毒性反应，对雏鸡和环境均安全，为DNA疫苗的安全使用提供参考。 5.堆型艾美耳球虫3-1E重组质粒PLGA微球包被技术研制，为鸡球虫DNA疫苗提供新的剂型。 6.鸡球虫入侵相关性蛋白ADF基因和3-1E基因串联表达，表达的重组蛋白能诱导雏鸡产生较高免疫反应，抗球虫指数为169.82，效果优于单一抗原。 7.研制鸡球虫病中药免疫防治技术，复方中药制剂防治鸡球虫病疗效显著； 8.研制鸡沙门氏菌病防治技术，鸡沙门氏菌分离鉴定、invA基因PCR鉴定，筛选出敏感药物，研制乳剂灭活苗，免疫保护效果显著。 9.研制防治鸡住白细胞虫病的中药方剂，治愈率75%～89.36%，有效率85%～91.25%，疗效显著。 10.研制防治鸡传染性支气管炎的中药方剂，治愈率80%～95.5%，有效率89%～97.83%，其防治效果优于常用抗菌西药。 技术经济指标： 1.鸡堆型艾美耳球虫裂殖子噬菌体抗体库筛选。 2.堆型艾美耳球虫pcDNA3-3-1E重组表达质粒构建。 3.堆型艾美耳球虫3-1E重组质粒PLGA微球包被技术研究及免疫效果观察。 4.堆型艾美耳球虫ADF/3-1E基因串联表达及其免疫保护效果。 5.复方中药制剂对鸡艾美耳球虫免疫保护作用。 6.鸡沙门氏菌病防治技术研究。 7.中药组方防治鸡卡氏住白细胞虫病疗效观察。 8.中药方剂防治鸡传染性支气管炎疗效观察。 推广应用情况及效益情况：该成果在石家庄、保定、沧州、唐山、邯郸、张家口等地推广应用，推广数量累计达6280万头，实现经济效益4480.39万元。培养研究生8名；发表论文23篇(SCI论文5篇)。