技术详细介绍
摘要：本发明提供了一种DNA转录方向和转录模板的系统检测方法及其应用。该方法主要是利用S1核酸酶能够特异性降解单链DNA的性质检测目的基因的转录方向；以待检基因链特异RT-PCR产物cDNA为模板，利用设计的基因上游引物F或下游引物R进行PCR，根据PCR产物电泳结果判断待检基因的转录模板是DNA的正链还是负链。该方法可用于分析DNA向mRNA转录过程中是单向转录还是双向转录；对于单向转录的DNA片段，能够进一步确定DNA转录的模板链是DNA的正链还是负链。另外，本方法可在12h左右完成检测，具有操作简单、速度快、成本低的显著特点，开发成检测试剂盒，可在科学研究、新基因功能研究中广泛推广应用。