[00250970]重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2蛋白及制备方法
交易价格:
面议
所属行业:
生物化工
类型:
发明专利
技术成熟度:
正在研发
专利所属地:中国
专利号:CN201410700412.6
交易方式:
技术转让
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技术入股
联系人:
科小易
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所在地:福建厦门市
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- 产权明晰
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对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
本发明公开一种重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2(IRF2)蛋白及制备方法,提取新鲜红鳍东方鲀肾脏总RNA,并反转录进行第一链的cDNA的合成;以所得到的第一链的cDNA为模板、设计引物扩增该基因的蛋白编码序列并与pMD19T载体连接得重组质粒,经双酶切后再与表达载体pET-32a(+)连接,获得重组表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中;通过IPTG诱导实现了重组蛋白的可溶性表达。该表达质粒表达的融合蛋白带有组氨酸标签,将细胞破碎后取上清纯化,避免了样品的变性和复性,不但操作简单,更主要的是蛋白结构不受破坏;重组蛋白纯度好、得率高且不易降解,适应于工业化生产。
本发明公开一种重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2(IRF2)蛋白及制备方法,提取新鲜红鳍东方鲀肾脏总RNA,并反转录进行第一链的cDNA的合成;以所得到的第一链的cDNA为模板、设计引物扩增该基因的蛋白编码序列并与pMD19T载体连接得重组质粒,经双酶切后再与表达载体pET-32a(+)连接,获得重组表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中;通过IPTG诱导实现了重组蛋白的可溶性表达。该表达质粒表达的融合蛋白带有组氨酸标签,将细胞破碎后取上清纯化,避免了样品的变性和复性,不但操作简单,更主要的是蛋白结构不受破坏;重组蛋白纯度好、得率高且不易降解,适应于工业化生产。