技术详细介绍
本发明涉及一种肝素前体硫酸化修饰酶的表达方法，该方法涉及生物技术领域，具体涉及新的核苷酸序列、原核表达系统的构建和制备方法。将人工合成的6‑ost‑3序列连接到pET‑28a表达载体上，并转化入大肠杆菌BL21感受态细胞中，经IPTG诱导表达胞内可溶性蛋白。溶菌酶破碎细胞，并收集上清，经镍柱纯化获得6‑OST‑3酶蛋白，其比酶活为1.53U/mg。本发明使用大肠杆菌表达制备6‑OST‑3酶蛋白，具有实验条件简单、成本低廉的优点，6‑OST‑3作为工具酶对于大分子肝素的修饰合成具有重要意义。