技术详细介绍
本发明涉及一种以低共熔物作为促溶剂利用静息细胞转化制备胆甾烯酮的方法。
⑴静息细胞在发酵培养基中培养好以后，离心，加入无菌磷酸缓冲液重悬作为转化液；所述静息细胞具有将胆固醇氧化生成胆甾烯酮的能力；
⑵在转化液中投入胆固醇，并添加低共熔物为促溶剂，乙酸乙酯萃取转化液，采用HPLC法检测产物胆甾‑4‑烯‑3‑酮的产率；
⑶用柱层析分离法将底物胆固醇与产物胆甾烯酮进行分离，并纯化得到胆甾烯酮纯品。
本发明采用低共熔物(DES)代替甲醇等有机溶剂作为绿色添加剂，添加低共熔物后，提高底物的分散率，有效促进底物胆固醇与菌体的接触，有效提高了静息细胞的转化效率，在加入和转化过程中操作条件温和，步骤简单。