[01492900]己烯雌酚酶免疫检测试剂盒的研制

该项目来源于科技部食品安全重大专项课题“农兽药多残留检测技术及快速筛选方法研究”(2001BA804A11-9)、“兽药残留检测技术研究”(2001BA804A18-05)。已烯雌酚(DES)是在人造雌激素中是作用较强的一种，据报道己烯雌酚的药效约为17-β雌二醇的10倍。在兽医临床上主要用于不明显发情动物的催情，促生长(育肥)等，还可用来治疗胎衣不下、排出死胎，治疗子宫炎等。但它具有导致畸胎、癌瘤、干扰内分泌、影响生殖、性别分化及生长发育等严重的毒副作用，所以在70年代末许多国家纷纷禁止使用。1979年，美国下令停止使用DES作为肉牛饲料添加剂。1980年，FAO/WHO决定全面禁止DES。欧洲共同体也于1988年1月1日，决定禁止在畜牧生产中使用雌性激素。上世纪50年代，我国由上海科发制药厂生产的DES，商品名为“肥鸡丸”，曾被广泛推广使用，60年代初，在我国还将DES列入全国高等农业院校试用教材《养禽学》，据等时介绍：已烯雌酚(乙酚酚)片可用特制注射器，包埋于公鸡后脑皮肤之下，一般6～10同龄前小公鸡用量l5毫克(1片)，大公鸡30～45毫克(2～3片)，药效时期为5-6周，过此时期又恢复公鸡雄相，故应在包埋后的4周出售。当时“化学阉鸡”曾风行一时。后来，由于国外研究证实，DES是一种致癌物质，我国决定于1979年正式禁止使用DES。目前，兽药残留的免疫分析研究正方兴未艾，国外几乎所有重要的兽药都已经建立或试图建立免疫检测。在DES残留监控体系中，目前进行筛选的最佳方法是商品化酶免疫检测(ELISA)试剂盒。而开展DES的监测工作，需要进口大量的进口试剂盒，但由于缺乏自主产权的检测DES的ELISA试剂盒，国内用于DES检测的试剂盒完全依赖于进口，检测成本昂贵，影响了这种方法在我国的推广使用，这也是我国DES屡禁不止的原因之一。因此，开发拥有自主知识产权的DES检测试剂盒具有非常重要的现实意义。其主要技术性指标：1．检测灵敏度：≤0.1ppb；2．检测时间：≤1.5hr；3．组织样品前处理 ≤2hr，无需使用C18柱；4．检测重复性：CV＜10%；5．检测范围：0.1～8.1ppb；6．有效期：6个月；7．检测准确性：与HPLC无显著差别；8．交叉反应率：＜20%。