[01421628]西兰花多肽提取工艺优化及其产品开发

1、课题来源与背景： 吉林省科技发展计划项目任务书：西兰花为一、二年生草本植物,营养成分齐全且含量高,蛋白质、脂肪、碳水化合物以及维生素等多种营养成分的含量都位居同类蔬菜之首。已有的研究表明,西兰花能有效对抗多种癌症,健康人经常食用西兰花也能起到预防癌症的作用,因此,对于西兰花抗癌活性成分的研究引起了人们的广泛关注。目前研究较多的西兰花抗癌活性成分主要是萝卜硫苷和硫代葡萄糖苷等,对其蛋白或多肽的研究还鲜有报道。本项研究中,我们对西兰花多肽进行了粗提,对粗提产物活性的初步研究表明,西兰花多肽具有抗氧化活性、对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤具有防护作用、对大鼠C6 胶质瘤细胞的生长有明显的抑制作用。欲开发利用西兰花活性多肽,有必要明确活性成分,优化提取、分离和纯化的工艺：研究清楚活性多肽的抗氧化应激、抗肿瘤作用机制,为进一步明确活性多肽的序列,以基因工程方法大量生产活性多肽,进行应用研究奠定基础。 2、技术原理及性能指标： 本研究在建立乙醇提取法进行西兰花粗多肽的提取,采用Sephadex G-25 凝胶过滤色谱柱对西兰花粗多肽进行分离,并进行SDS-PAGE电泳鉴定。建立并优化改良型丙酮沉淀法提取工艺,对西兰花提取工艺就行优化。应用DPPH法、邻苯三酚自氧化法、还原力测定等方法对西兰花多肽活性组分进行筛选和抗氧化活性研究。体外培养人静脉血管内皮细胞EVC-304,H2O2 诱导细胞损伤模型,评价西兰花多肽对血管内皮细胞损伤的防治作用。抗肿瘤实验结果表明,西兰花多肽可能通过阻滞细胞周期、激活细胞凋亡途径,使C6 胶质瘤细胞的生长受抑制,上述研究结果为西兰花多肽的深加工奠定基础。 3、技术的创造性与先进性： 本研究的目的是结合实验室特色,将微波技术运用到西兰花多肽的提取工艺中,利用生物化学、分子生物学技术对西兰花多肽提取工艺进行优化,对分离纯化的活性组分进行活性研究与筛选,推动西兰花产品的开发研究。 4、技术的成熟程度,适用范围和安全性： 本研究结合实验室特色,将微波技术运用到鹿茸多肽的提取工艺中,促进鹿茸多肽的提取率,同时我们设计了鹿茸多肽-胶原/壳聚糖缓释给药系统,能够充分开发利用鹿茸资源的药用价值,为鹿茸多肽进行深层次的加工与利用,发挥其药用用途奠定基础。同时,鹿茸多肽-胶原/壳聚糖作为新型的促进骨修复的新型材料,通过开发鹿茸多肽缓释系统,能够有望将鹿茸多肽开发用于临床治疗,给骨折患者带来希望,将会带来巨大的社会及经济价值。 5、应用情况及存在的问题： 本研究在建立乙醇提取法进行西兰花多肽提取的基础上,建立并优化改良型丙酮沉淀法提取工艺,通过体外抗氧化活性研究、对血管内皮细胞的保护作用研究及对神经胶质瘤细胞的作用和机制研究,确定了西兰花多肽提取物具有较好的抗氧化活性、抗肿瘤活性和防护细胞损伤功能,为进一步进行西兰花多肽的活性机制研究及保健品开发提供参考,具有良好的开发应用前景。