[01412908]新型嗜酸乳杆菌食品级载体系统的构建及其在出血性大肠埃希菌O157：H7活载体疫苗研制中的初步应用

肠出血性大肠埃希菌（enterohaemorrhagic E.coli, EHEC）O157：H7主要通过消化道传播,临床可引起出血性肠炎、溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等,甚至可导致死亡。自1983年Riley等首次确认EHEC O157：H7引起的严重出血性结肠炎以来,EHEC O157：H7引起的散发病例和暴发流行在世界范围内不断发生,全球发病呈上升趋势。目前对EHEC O157：H7感染尚缺乏有效的防治措施,尽管大部分抗生素可将其杀灭,但释放出来的志贺毒素会增加并发溶血性尿毒综合症的危险。鉴于EHEC O157：H7 暴发流行的严重性和抗生素治疗的危险性,安全有效的疫苗是预防其感染的首选,但目前尚无可用于人的疫苗,因此疫苗的研发尤为重要。 EHEC O157：H7的致病性主要体现于细菌在宿主体内的黏附定植和产生毒素两个方面。黏附与定植是细菌感染的第一步,Tir和EspA在细菌黏附和形成特征性的黏附和抹平损伤（attaching and effacing lesion, A/E lesion） ,即A/E损伤的效应分子传递中起到重要的桥梁作用,若阻断O157：H7细菌感染的黏附起始阶段则可以避免和擦拭性损伤的发生,从而终止感染。其中黏附素Intimin、紧密黏附素受体Tir和Ⅲ 型分泌系统T3SS相关蛋白是EHEC O157：H7重要的毒力因子,有研究表明人体在感染EHEC O157：H7后对Tir、Intimin、EspA、EspB有强烈的免疫应答,提示这些蛋白可作为潜在的疫苗候选抗原。因此,我们选择EHEC O157：H7 Tir和EspA两个关键性定植功能蛋白作为研制预防其感染的疫苗候选抗原,构建具有保护性的新型O157：H7 Tir和EspA双价抗原的疫苗。 本项目就以上问题,构建了2个EHEC O157：H7相关疫苗： （1）构建EHEC O157：H7 espA-Tir-M双抗原重组蛋白亚单位疫苗; （2）构建嗜酸乳杆菌表达EHEC O157：H7抗原的活载体疫苗,并完成免疫原性和动物保护实验。