[01401327]基于CRISPR/Cas9技术研究弓形虫毒力因子ROP5的转录调控机制
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所属行业:
生物医药
类型:
非专利
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技术详细介绍
弓形虫(Toxoplasma gondii) 是广泛分布的机会性致病原虫,其感染已成为严重的世界性公共卫生问题。棒状体蛋白5(ROP5)是弓形虫重要的毒力因子,但是导致毒力差异的调控机制仍不明确。本研究利用CRISPR/Cas9系统(包括Cas9核酸酶和引导RNA)对弓形虫强、弱毒株(I型、Ⅲ型)rop 5基因上游调控序列进行编辑,结合瞬时转染、荧光素酶报告系统、Western-blot、弓形虫攻击感染等体内、体外实验手段,系统分析弓形虫ROP5上游序列rop5-ups的缺失与插入对rop5基因表达及对小鼠毒力的影响,阐明rop5基因上游序列对ROP5的转录调控机制,为寻找新的药物作用靶点和疫苗候选分子提供理论基础,对预防和控制弓形虫病具有重要科学意义。该研究在国内外杂志发表论文2篇,其中SCI论文1篇。培养硕士生1名。
弓形虫(Toxoplasma gondii) 是广泛分布的机会性致病原虫,其感染已成为严重的世界性公共卫生问题。棒状体蛋白5(ROP5)是弓形虫重要的毒力因子,但是导致毒力差异的调控机制仍不明确。本研究利用CRISPR/Cas9系统(包括Cas9核酸酶和引导RNA)对弓形虫强、弱毒株(I型、Ⅲ型)rop 5基因上游调控序列进行编辑,结合瞬时转染、荧光素酶报告系统、Western-blot、弓形虫攻击感染等体内、体外实验手段,系统分析弓形虫ROP5上游序列rop5-ups的缺失与插入对rop5基因表达及对小鼠毒力的影响,阐明rop5基因上游序列对ROP5的转录调控机制,为寻找新的药物作用靶点和疫苗候选分子提供理论基础,对预防和控制弓形虫病具有重要科学意义。该研究在国内外杂志发表论文2篇,其中SCI论文1篇。培养硕士生1名。