[01371381]陕产重楼总皂苷纳米长循环脂质体作用及其机制研究

本项目在已有实验、文献资料的基础上对陕产重楼总皂苷的提取纯化工艺进行优化,并对其进行初步的理化性质及其作用机制研究。选择脂质体为制剂的剂型,对该制剂的处方、制备工艺、质量标准、药效学进行研究,初步开发出一种具有巨大市场潜力的新型中药制剂。本研究首先采用Box-Behnken效应面法优化重楼中重楼总皂苷的提取工艺。以乙醇浓度、提取时间及料液比为自变量,重楼总皂苷的提取率为因变量,通过对自变量与因变量的完全二次响应曲面的回归拟合,用效应面法选择最佳提取工艺,并将预测值与观测值进行比较。重楼中重楼总皂苷的最佳提取工艺参数为：乙醇浓度为62.5%、液料比为16.5、提取时间为3.0 h,通过3批验证提取工艺参数,重楼总皂苷的提取量实测值与回归模型预测值的相对误差为2.61%。使用Box-Behnken效应面法优化重楼中重楼总皂苷的提取工艺,方法简便,结果可靠,预测性良好。 其次制备重楼总皂苷长循环脂质体,并对其进行表征。以粒径、PdI、Zeta电位及包封率为评价指标,考察制备重楼总皂苷长循环脂质体的各个因素。并采用Malvern粒度仪测定脂质体的粒径分布、PdI及Zeta电位,透射电镜考察其形态,并考察长脂质体的稳定性。重楼总皂苷长循环脂质体的平均粒径为109.4±32.7 nm,PdI为0.171±0.036,zeta电位为-36.7±4.5 mV,包封率为93.5±3.2%;透射电镜显示脂质体粒径均一,成球状分布;长期稳定性研究表明,长循环脂质体在4 ℃条件下放置3个月稳定。重楼总皂苷长循环脂质体制备工艺简单易行,可以得到包封率高、稳定性好的脂质体制剂。最后分别对体内及体外的抑制肿瘤效果进行研究。其中体内研究对HepG2细胞的抑制作用进行研究,研究表明重楼皂苷及脂质体组对HepG2细胞的生长抑制作用均随剂量的升高而增强。脂质体组对HepG2细胞的生长抑制效果明显好于重楼总皂苷溶液组,具有显著性差异（P ＜ 0.05）。采用以异位皮下移植肝癌H22实体瘤小鼠为动物模型,考察了脂质体与药物溶液的抑瘤效果,结果表明脂质体具有较好的杀灭抗肿瘤的能力,与模型组相比较,重楼溶液组及脂质体组TNF-α含量显著降低。