[01370384]基于多层次药效模型寻找当归补血汤调控红系祖细胞分化的物质基础

当归补血汤作为传统补血类药物,临床疗效显著,具有多种成分协同发挥作用和整体调节的特性,能够从根本上发挥治疗作用。但具体药效成分有待阐明。本研究基于血清药理学,利用骨髓细胞作为细胞模型,评价末次给药不同时间点含药血清中小分子和大分子药效的差异,并利用HPLC-MS分析不同时间点含药血清入血成分的差异,后利用相关性分析寻找潜在的药效成分,同时寻找当归补血汤其它潜在的作用靶点。主要取得以下实验结果,1)当归补血汤给药方式和取血时间确定：腹腔注射药效果优于灌胃,当归补血汤能够促进小鼠骨髓中红系相关细胞的比例,给药后最佳取血时间为14天。2)体外药效及药效成分检测：不同时间点含药血清小分子的药效有显著差异,不同时间点含药血清入血成分的含量有显著不同,找到了7中潜在的当归补血汤的药效成分。同时含药血清中大分子也能够显著增加骨髓基质细胞的数目,蛋白组结果表明当归补血汤作用后含药血清中上调蛋白190种,下调蛋白53种,其中46个与造血相关的蛋白,主要与细胞骨架调节、细胞粘附和造血有关。ELISA结果表明当归补血汤组CD14、LTF、Vinculin蛋白量显著升高。3)作用靶点研究：脾脏是当归补血汤发挥整体调节作用的潜在靶点,当归补血汤组脾脏中红系相关细胞数目显著提高,红系祖细胞数目显著提高,转录组结果表明当归补血汤作用后表达上调基因166个,下调基因81个,其中与红细胞生成相关的通路有Focal adhesion、JAK-STAT、PI3K-AKT等。qPCR结果表明,CCR1、CXCL1、IL1B、PTGS2等基因表达显著上调。本研究寻找到了7种当归补血汤的潜在药效成分,并初步阐明了当归补血汤其它的潜在作用靶点,为后续机制研究和其它药效成分挖掘奠定了基础。