[01369540]一种高纯度灵芝多糖的制备方法

本发明提供了一种灵芝多糖的制备方法,解决了现有技术中的缺陷。 本发明灵芝多糖的制备方法,包括如下步骤： ①水提法提取粗多糖; 将灵芝子实体粉碎成小块,按照1kg子实体：15～25L水的比例加水并加热至沸腾,1～3小时,之后用滤布（200目）过滤,滤渣重复上述步骤再提取1～2次后过滤,合并滤液,干燥。 ②将粗多糖按0.5～2%的质量比配制成水溶液,加入木瓜蛋白酶,木瓜蛋白酶的含量为粗多糖的3%～5%（质量百分比）,于37～40℃,反应20～40分钟;木瓜蛋白酶反应的作用是水解粗多糖中的蛋白。 ③酶反应后的粗多糖溶液加入弱碱性阴离子树脂柱中进行处理,其中粗多糖溶液与弱碱性阴离子树脂的比例为：1升水提溶液：1.5～2公斤树脂;流速1～2ml/min;收集处理之后的流出液;这一步的作用是脱色和除去水解后的蛋白。 ④将收集到的流出液用1万分子量级别的中空纤维柱进行超滤,或用1万分子量级别的透析膜进行透析处理;收集大于1万的部分,浓缩、干燥。 最终得到脱色并除去大部分蛋白及其他杂质的灵芝多糖产品。 本发明使用的灵芝菌种为赤芝,产自浙江龙泉; 本发明使用的蛋白酶为木瓜蛋白酶,购自北京鼎国生物技术有限公司。 本发明使用的弱碱性阴离子树脂可选自下述树脂：环氧骨架,功能基团为-NH2、=NH、≡N、=N=,具体如上海华震科技有限公司提供的335型树脂。树脂在使用前最好先经过预处理,使其pH值为7～8。预处理方法如： 先用3%的盐酸浸泡4小时,之后用蒸馏水冲洗至中性;再用3%的NaOH溶液浸泡4小时,之后用蒸馏水冲洗至pH7～8; 使用该方法制备的灵芝多糖的含量可达到50%以上,且多糖的活性也比粗多糖要高。并且该方法操作要求简便易行,适合放大到规模化生产。