[01351222]凉粉草多糖抗辐射生物活性的研究

人无时无刻都受到辐射的威胁,目前已知最佳辐射保护剂如WR-2721（amifostine）,因其毒副作用较大、体内半衰期很短、价格昂贵,其应用价值受到限制,本项目首先通过对凉粉草多糖提取因素和纯化工艺的研究确定了凉粉草多糖提取率相对较高且纯度较高的工艺。经过单因素和正交试验得出,在碳酸钠溶液的 浓度为1.5%,凉粉草和提取液的料液比为9/250（m/v）,在95℃水浴锅提取时间为1.5h的条件下多糖提取率最高。接着以100mL料液中将加入10%20mL的双氧水对凉粉草粗多糖溶液脱色,在此条件下脱色可达到较好效果且多糖损失较小。再在0.1MPa的压强下使脱色多糖溶液经过10K与50K中空纤维膜管循环超滤2小时,分别取其截留液部分加入70%的乙醇溶液使草胶析出,经多糖含量测定、分子量分布和单糖组成的分析,发现截留分子量为10K的膜组件更适合凉粉草多糖的超滤纯化。 接着主要评价了凉粉章多糖的体外抗氧化性质,通过考察其自由基清除活性,FeZ‘整合能力、还原能力、抑制FeSO4-H202引发的小鼠组织匀浆中脂质氧化产物丙二醛的生成率、刺激巨噬细胞产生NO的活性和对S180肿瘤细胞的抑制能力,最后确定出凉粉草多糖的各抗氧化性的量效关系。实验结果表明;凉粉草多糖能有效清除羟基自山基,26.5江g/ml时清除率为41.66%;对DPPH · 自由基有着明显的清除作用,清除率最高达到52.66%;未显示清除超氧自由基的作用;对Fe2“具有一定的整合能力,螯合能力值达到42.9%,浓度是26.卑g/ml;对小鼠肝脏中MDA的水平具有明显的降低作用,MDA含量最低为2.6865nmovml。使用凉粉草多糖进行Raw264.7刺激巨噬细胞产生NO活性实验,发现在凉粉草多糖的刺激作用下,巨噬细胞的NO产量明显上升,并随着多糖剂量的增加而提 高。在S18副’癌细胞抑制实验中,凉粉草多糖体现了约15%的肿瘤抑制效果。显示出凉粉草多糖在细胞免疫调节方面具有一定生物活性,而在抗细胞肿瘤方面的生物活性不显着。最后考察了MJ3G的抗辐射生物学活性。 阴日G的抗辐射效力实验表明：正常组小鼠30d存活率为100%,且体重明显增加,照射组小鼠则出现食欲下降、松毛、活动减少、稀便、体重无增加或显格下降等情况;MBG给药组动物上述情况均明显改善,30d存活时间及存活率均明显高于单纯照射组,且在12.5～50mg/kg范围内呈剂量一效应关系,最高生存防护效力达3.46,最高存活率为单纯照射组的8.6倍。MBG对受辐射小鼠造血系统及免疫器官重量影响的结果表明;小鼠照射后第4天和第10天,单纯辐射组和MBG+辐射组动物WBC、RBC和PLT与正常组比较均有显若降低,其中MBG+照射组则能显抑制上述指标的降低,提示对照射所致造血系统损伤有显防护作用。单纯照射组小鼠脾指数和胸腺指数均明显低于正常组,MBG+照射组动物脾指数也有所降低。但显著高于单纯照射组,MBG对动物胸腺指数也有轻度提高,但与单纯照射组无显着差异。上述试验表明,M80的确具有一定性能的抗辐射损伤能力。MBG的支链结构、甲酯化结构以及羧基’（醛羧基）可能是MBG产生抗辐射能力的活性部位,其抗辐射效应可能与MBG体外的抗氧化、清除自由基等活性有关。此研究结果显示凉粉草多糖对于辐射所致的遗传损伤具有保护能力,有助于开发预防与治疗辐射伤害的药物,让医生在辐射的防护领域中有更多的选择,并可造福长期在辐辐射环境中的工作人员和接受放射治疗的患者。