[01311075]鱼病多联免疫检测药物盒

鱼病多联免疫检测药盒,涉及单克隆抗体制备及应用技术领域。本发明将鳗弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华菌免疫小鼠,进行细胞融合,再克隆化,制备出特异性很强,且效价较高的单克隆抗体,按一定比例配制成多联免疫检测药盒,能随时快捷、准确地检出各种鱼病,为鱼病的及时有效治疗提供保证。 鱼病多联免疫检测药物盒,其特征是：将鳗弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、 迟缓爱德华菌的标准菌株经扩增培养后,用1%甲醛固定过夜灭活,将浓度为1×108个/毫升灭活菌液以0.5毫升/只的量,腹腔注射免疫小鼠;于第一次免疫后第7、14、28天分别追加免疫一次,第31天取脾细胞1×108个/毫升和SP2/0骨髓瘤细胞2～3×107个/毫升进行细胞融合;将经细胞融合的细胞悬液加到辅有饲养细胞的96孔培养板中,每孔0.1毫升,在37℃,含5%CO2的孵箱中培养;用酶联免疫反应法检测阳性克隆,将确定为阳性的孔以有限稀释法,进行克隆化;将阳性克隆的杂交瘤细胞株扩增培养,将扩增培养的杂交瘤细胞调整为1×106个/毫升,以每只小鼠0.5毫升的量,腹腔注射接种到Ba/b/c小鼠,接种后7～14天,处死小鼠,吸取腹水,即为腹水型单抗;将鳗弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华菌的腹水型单抗以酶联免疫反应法进行效价、亚类及交叉试验,将这4种效价均为10-7,且不与其它弧菌及肠道其它杆菌发生交叉反应的特异。