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本项目名称为“透明颤菌血红蛋白基因在黄单胞杆菌中的克隆与表达”,由保定市科技局资助,资助经费2万元,项目编号为03J004。
黄原胶是由甘蓝黑腐病黄单胞杆菌以碳水化合物(如玉米淀粉)为主要原料经微生物发酵而得到的一种高分子量的多糖物质,是目前国际上集增稠、悬浮、乳化、稳定于一体,性能最优越的生物胶。黄原胶无味、无臭、无毒、食用安全、易溶于水。在水溶液中呈多聚阴离子,具有高粘度、耐高温、抗盐、耐酸碱、抗剪切、良好的互溶性等的理化性质。
由于黄原胶的优良特性,它被广泛应用于食品、农业、日化工业、石油工业及医药等多种行业,其中在食品工业中应用量最大。在食品工业的添加剂中,黄原胶是一种最有效的抗癌剂,同时也是目前国际上炙手可热的微胶囊药物囊材中的功能组分,在控制药物缓释方面发挥重要作用。随着黄原胶应用领域的不断拓展,黄原胶生产的国内外市场前景广阔。
透明颤菌血红蛋白是一种类血红蛋白,在微氧条件下它能够促进微生物运输氧、贮存氧和利用氧的能力,将编码该蛋白质的基因Vgb已经转入多种微生物体内促进了微生物的生长量。
按照此原理,本研究组构建了含有低氧启动子和透明颤菌血红蛋白基因的表达载体pUC-LV,将该重组质粒转入大肠杆菌,获得了表达,同时促进了大肠杆菌的生长,增长量为75%以上。
将该重组质粒转化到黄单胞杆菌中,采用不同的转化方法,经多次转化、筛选,得到转化子,对该转化子进行发酵培养,发酵产量提高了15.97%,1%的粘度达到800CP。
本项目利用基因工程手段对黄单胞杆菌进行改造,得到了优良性状的菌种。达到国内先进水平。
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