[01271735]肝癌患者血清中特异性循环micro RNA的筛选、鉴定及诊断试剂盒研制

研究通过生物信息学和分子生物学技术等高通量筛查选出在肝癌患者及正常人血清标本中表达水平具有明显差异的miRNA-4281、miRNA-122a和miRNA-6086。

并通过real-time PCR技术鉴定了这些差异循环miRNA的正确性，建立了以特异性差异循环miRNA为新型诊断标志物的qRT-PCR临床诊断技术。

本研究发现肝癌患者血清miRNA-4281的表达量较正常人明显升高， miRNA-4281检测对于肝癌诊断的灵敏度和特异度均较高，并且其与AFP的表达水平无明显相关性，可做为肝癌的独立诊断标准。

miRNA-4281的表达水平与患者的性别肿瘤大小、疾病分期、肝功能情况以及存在过乙型肝炎病毒感染等无明显差异，提示 miRNA-4281可以用于肝癌的诊断，有可能作为一种新的肿瘤标志物。

本研究还发现肝癌患者血清 miRNA-122a 水平与正常人血清相比明显下调，而miRNA-6086水平明显升高。

但二者与患者年龄、分期、分型、肿瘤大小及 AFP 水平关。microRNA 联合 AFP 可以提高对肝癌诊断的特异度。

肝癌患者循环 miRNA-6086较正常人表达上调，其表达量越高生存期限越短;但是肝癌患者循环 miRNA-122a较正常人表达量下调，且表达量越低生存时间反而越长本研究发现肺癌患者血浆中miRNA-1268的表达水平明显高于正常人，且 miRNA-1268高表达者生存时间明显低于低表达组，miRNA-1268的表达水平与肿瘤 TNM 分期相关。

血浆 miRNA-1268可能是肺癌的特异性循环miRNA，对肺癌患者的诊断及预后判断有重要价值。

本研究在喉癌（LC）细胞鉴定出了35种与bcl-2相关的蛋白，并通过免疫共沉淀和免疫印迹分析重点研究了HSP90β。

通过蛋白质相互作用（PPI）分析表明，Bcl-2?HSP90β相互作用可能参与了LC的抗凋亡的进展。

进一步的结果显示Bcl-2-Hp90β交互作用受到干扰可抑制Bcl-2的抗凋亡能力，使得LC caspase激活。

这些结果对Bcl-2在肿瘤的形成、肿瘤细胞的存活、发展和转移中的作用有了更好的理解。

并有可能据此设计一种新的针对Bcl-2?HSP90β的靶点来治疗LC。

在公开刊物上发表研究论文5篇。

培养南华大学硕士研究生3名。

培养邵阳学院科研人员5名。