[01263930]海贝活素的应用研究

《海贝活素的应用研究》项目系青岛市科技局项目，合同批准号为：05-1-HY-81。

课题组对海洋蚶类生物的制备工艺和质量标准等进行了系统的研究，并对蚶类提取物--海贝活素分别进行了系统的药学、药理学和毒理学研究。

药学研究：

①制备工艺和质量标准研究：对蚶类提取物海贝活素冻干粉的制备及质量标准进行了研究，结果表明海贝活素冻干粉的制备工艺稳定。该制备方法和在此基础上制备的肠溶颗粒剂已申请两项国家发明专利。

②分子量和指纹图谱研究：对海贝活素冻干粉进行了初步的指纹图谱研究及相关试验，建立的液相色谱指纹图谱测定方法稳定可靠，符合国家药品监督管理局颁发的《中药注射剂指纹图谱（暂行）》的要求。三批样品批次间样品的指纹图谱一致。应用聚丙烯酰胺凝胶电泳，海贝活素冻干粉中的蛋白或多肽分离良好，条带清晰。由电泳结果可见，样品为含多种蛋白的混合物，其分子量分布较宽，在15，000Dal和23，000Dal左右的组分含量较多。

③采用Superdex75凝胶过滤层析对海贝活素原料进行分离、分析，获得三个组份即P1、P2、P3。

药理学研究：

体外实验研究：

①在0.125mg·ml-1-0.5mg·ml-1浓度范围内，海贝活素可以增加人肺腺癌细胞株A549细胞的凋亡率，其机理为抑制细胞增殖，损伤细胞DNA，启动细胞凋亡通路，将细胞周期阻滞与G2/M期，起到体外抗肿瘤细胞的作用。

②海贝活素可抑制K562和K562/ADM细胞生长，其机理为通过下调bcl-2蛋白和上调细胞bax蛋白表达，诱导细胞凋亡，使K562细胞生长周期停滞于G1/S期，起到抑制K562/ADM耐药细胞增殖的作用。

③海贝活素P1、P2和P3组分对BEL-7402人肝癌细胞分别具有抑制作用，其抑制率分别随药物浓度增加而提高。

体内实验研究：

①海贝活素500mg·kg-1连续给药12天，能够明显延长S180腹水小鼠和肝癌Hep腹水小鼠的生存时间，提高延命率。

②海贝活素500mg·kg-1、250mg·kg-1、125mg·kg-1剂量组对OS-RC-2裸小鼠移植模型的抑瘤率分别为55.80、52.23和44.82%。

③海贝活素250.0、125.0和62.5mg·kg-1剂量组人肺癌A549细胞系裸小鼠模型肿瘤生长抑制率分别为63%、56%和49%。

海贝活素在50mg·kg-1-200mg·kg-1剂量范围内，对荷瘤小鼠的肿瘤具有抑制作用，其机理与该物质降低bcl-2mRNA、P53和P16蛋白在肿瘤组织中的表达，增高Bax蛋白的表达，诱导Lweis肺癌组织细胞凋亡有关。

在450-1800 mg·kg-1剂量范围内，海贝活素对白血病K562细胞裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为99.96%、96.41%、53.41%，对K562/AO2的抑瘤率分别为99.96%、95.89%、44.13%，抗肿瘤效果良好，且没有表现出明显的毒副作用。

海贝活素组分P3两个剂量组(500mg·kg-1，250mg·kg-1) 对S180肉瘤的抑瘤率分别为30.6%和29.5%，有一定抑瘤作用。

毒理学研究：海贝活素急性毒性试验和长期毒性试验结果表明，海贝活素未出现明显的毒性反应，临床应用较为安全。

海贝活素即将开发为肠溶制剂，从有实际或潜在的临床应用价值观来看，其价值是难以估量的，该成果的推广应用必将带来巨大的经济效益。