[01251920]黄花忍冬主要活性成分的提取及活性研究

本项目以黄花忍冬的花和果实为原料，对其中生物活性很强的多糖、黄酮、绿原酸和挥发油进行提取分离，并对黄花忍冬的多糖、黄酮、绿原酸和挥发油在抑菌性和抗氧化性方面进行研究。

经研究得出以下结论：

1、提取黄花忍冬绿原酸的最佳工艺条件：提取温度73℃、pH值为3.6、提取时间4.5h、料液比1:65。在此条件下测得黄花忍冬花和果中绿原酸分别为3.50％和3.10%。

经活性研究表明黄花忍冬绿原酸对羟自由基（·OH）、超氧自由基（O2-·）和DPPH自由基（DPPH·）均有清除效果;对四联球菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、青霉、黑曲霉菌都有不同程度的抑菌效果。

从贴片法和二倍稀释法得到黄花忍冬果绿原酸的抑菌结果为四联球菌、金黄色葡萄球菌效果最好，大肠杆菌、枯草杆菌效果一般，黑曲霉、青霉效果较弱。

2、提取黄花忍冬花和果实中总黄酮的最佳提取条件分别为，乙醇浓度70%、料液比1:60、提取温度60℃、提取时间6h、提取1次，在此工艺下黄花忍冬花中总黄酮提取率为19.4mgog-1;

乙醇浓度80%、提取时间6h、提取温度50℃、料液比1:60、提取次数1次，在此工艺下黄花忍冬果中总黄酮提取率为25.3mgog-1对提取液运用D101大孔吸附树脂纯化出黄酮类化合物。

在高效液相色谱检测，发现黄花忍冬花和果含有相同的黄酮类化合物，经液-质联用技术检测黄花忍冬花和果中含有的黄酮单体为金丝桃苷、异槲皮素、芦丁、槲皮苷、槲皮素。

对纯化的黄花忍冬花和果中总黄酮进行活性研究表明对羟基自由基（·OH） 、DPPH自由基（DPPH·）清除效果较好，但对超氧自由基（O2-·）清除效果不显著;

对大肠杆菌、黑曲霉菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、酵母菌、根霉菌抑菌和杀菌能力，花中比果中的总黄酮的抑菌和杀菌效果要显著一些。

对细菌的抑菌和杀菌作用较根霉菌、酵母菌明显，对酵母抑菌和杀菌作用较差，而在细菌中对G+菌的抑制效果强于G-菌。

3、通过超临界CO2流体萃取技术对黄花忍冬中挥发油的提取并对黄花忍冬中挥发油进行了抗氧化性和抑菌性及其化学组成研究结果表明，黄花忍冬挥发油对超氧阴离子、羟基自由基和DPPH自由基有很好的清除效果，并对常见的食品污染菌也有很好的抑制效果。

黄花忍冬挥发油是一种天然的抑菌剂，对有害生物防治、疾病的治疗、食品领域及化妆品产业均有开发利用价值。

运用气质联用技术对黄花忍冬中挥发油的化学组成进行了定性分析，研究结果表明黄花忍冬花和果中挥发油的组成很相近，其挥发油的化学组成称为：α-蒎烯、4-甲烯基-1-异丙基-环[3.1.0]己烷、8-异亚丙基双环[5.1.0]辛烷、萜品醇、正十四烷、α-古巴烯、β-大马酮、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸丁基-2-异丁酯，这为今后对黄花忍冬药用价值的开发利用奠定理论基础。

超临界CO2处理后的黄花忍冬花和果粉末，用热水提取，纯化得到的多糖颜色为乳白色并无异味儿。

运用苯酚-硫酸法测得黄花忍冬花和果中多糖的含量分别为17.3%和14. 32%。

黄花忍冬花和果中多糖对oOH、O2-o和DPPHo三种自由基具有不同程度的清除，对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、酵母菌、青霉、黑曲霉均有不同程度的抑制活性表明黄花忍冬花和果多糖是良好的天然抗氧化剂和抑菌剂。

采用HPLC法对黄花忍冬花和果多糖的单糖组成的研究，研究结果表明：黄花忍冬花多糖可能由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖组成，黄花忍冬果多糖可能由甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成，还有待于进一步研究。

综上所述，黄花忍冬开发前景广阔，将越来越受到人们的关注，将使这一宝贵资源得到合理应用。本项目所得数据可为黄花忍冬的药用价值和综合利用奠定理论基础和数据支持，具有重大的意义，为人类的健康尽以微薄力量。这一项目的研究不仅使黄花忍冬这一资源不被浪费，而且还可使其创造更大的经济价值，进而实现了经济生态、社会效益的高度统一。