[01245112]番茄中关键抗冷基因SLAC1的克隆与功能鉴定
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技术详细介绍
实验以番茄为对象， 通过转录组测序栽培番茄，多毛番茄和类番茄茄，通过信息学进行基因分析，预测到与抗冷机制有关的基因SLAC1，并通过克隆转基因番茄，在不同逆境情况下看克隆番茄和对照的栽培番茄进行抗逆比较，通过过表达和干扰都技术手段对SLAC1基因抗逆情况进行分析。
利用转录组测序结果，抗逆功能分析和生理指标分析，进行生物信息系，并且通过酵母双杂交试验验证抗逆基因的调控途径。
实验结果表明：1. 生物信息学分析表明SLAC1基因进化保守并具有多种分子功能。2. 荧光定量结果表明SLAC1基因响应逆境胁迫，其中SLAC1响应强烈，表达量上调。3. 基因沉默SLAC1胁迫处理后对相关酶进行检测，结果表明沉默植株抗逆境能力降低。4. 在酵母双杂交试验中发现SLAC1与atpA存在互作;GST pull down体外验证结果发现SLAC1与atpA同样存在互作。