[01224699]应用蛋白质组学方法研究大肠癌转移相关蛋白

1.背景　　本课题首次应用蛋白质组学方法寻找与大肠癌淋巴结转移相关的蛋白，通过建立了正常癌旁组织、大肠癌无淋巴结转移组、淋巴结转移组蛋白质二维电泳差异表达谱，并进行了质谱和生物信息学比较分析这些差异表达蛋白，经过了临床标本中的验证，初步确定这些差异表达蛋白在大肠癌淋巴结转移发生的意义，将为大肠癌侵袭和转移分子机制的研究以及大肠癌临床分期和预后预测提供重要的信息。本课题研究成果已在国内外权威期刊上发表了一系列大肠癌研究的相关论文，其中关于大肠癌淋巴结转移相关蛋白的蛋白质组学研究文章已被世界顶尖杂志，哈佛大学主办的《蛋白质组学研究杂志》全文刊登（影响因子5.151分），并被健康报、湖南日报、潇湘晨报、大众卫生报、校报、院报等多家报刊报道及新浪网、中国新闻网等知名网站转载，收到了良好的社会效果。　　2．总体性能指标、特点、特色、关键技术、创新点　　本课题的关键技术是蛋白质检测方法，包括了蛋白质组学相关技术（二维电泳、质谱技术、生物信息学）、Western Blot、免疫组织化学方法，这些方法都是检测细胞/组织中蛋白质的表达，是成熟的方法，所以在性能指标方面可靠性和可重复性高。但在敏感性、特异性等方面各有千秋，蛋白质组学相关技术主要是用于蛋白质差异表达的比较和大规模筛选，随着其基本技术二维电泳、质谱技术、生物信息学在设备上的不断更新换代，在蛋白质分离效率和鉴定效率方面均有质的飞跃，筛选效率高，可重复性高，而Western Blot和免疫组织化学方法是应用抗原-抗体反应特异地检测某种蛋白质的表达，Western Blot敏感性高而免疫组织化学方法主要用于组织/细胞中某种蛋白的原位表达情况，将这三种方法结合应用能很好地确定一些已有蛋白的新功能以及发现一些新蛋白，是临床蛋白质组研究中的重要策略，也是本课题的技术特点。　　本课题的特色和创新点有两点，其一是应用临床标本，即大肠癌肿瘤组织进行研究，这一方面基于蛋白质组技术分离技术的成熟和改进，另一方面和以往以细胞为研究对象比较，对来自患者的肿瘤组织研究结果更能放映体内实际情况，其结果能更快地用于临床，并且很多与临床相关的指标以患者组织标本作为研究对象才有意义，如临床分期、预后预测等；其二是开始以临床指标作为我们研究的出发点和目标，在本研究中，研究内容涉及淋巴结转移，临床分期等方面，对临床蛋白质组的研究范围大大拓展了。　　综上所述，本研究为临床蛋白质组学的研究进行了一些开创性的工作，可能对大肠癌以及其它恶性肿瘤的研究提供新的思路。　　3．技术成熟程度，对社会经济发展和科技进步的意义与价值　　本课题的关键技术（蛋白质组学相关技术、Western Blot、免疫组织化学方法）是成熟的方法，可靠性和可重复性高，将它们有机结合应用于恶性肿瘤生物标志物的筛选和确定将是一种有效的研究策略，可望在肿瘤发生、侵袭和转移、预后预测、放化疗敏感性预测等诸多方面发挥巨大作用，能较快解决一些临床工作中的实际问题，将产生重大的社会效益和经济效益。　　4．推广应用情况、条件与前景　　本课题的推广应用将体现在两个方面，其一本研究筛选及初步验证的与大肠发生、淋巴结转移、分化及分期的蛋白质，可以作为候选的诊断和治疗生物标志物，在经过进一步更为严格和细致的验证工作后，这些候选标志物能用于临床，指导临床的诊断和治疗；其二，也是更为重要的是本课题所采用的临床蛋白质组的研究策略和思路，能被推广应用于其它肿瘤的研究，前景广阔，意义重大。　　5．存在的问题　　由于课题资助有限，我们的研究工作刚刚走了第一步，而要确定一种肿瘤标志物也不是通过一个课题能完成的，必须经过大规模的临床标本验证（最好是多中心研究的验证）以及必要的体外实验验证，此外，作为肿瘤标志物如果能在血清中检测其应用价值更广，而血清蛋白质组学目前的研究效果还不理想，有待进一步提高。但有了这第一步的良好开端，我们将申请更多课题资助，将已取得的成果继续下去，争取尽早应用于临床，造福患者。