[01206330]磁性纳米人工内切酶的研究及其应用

本课题首先用化学方法合成了磁性纳米粒子，用反相微乳液法在磁性纳米粒子上包裹SiO2，形成核壳结构。合成了寡聚核苷酸铈配合物和肽核酸铈配合物作为分子剪刀并应用TEM、SEM、AFM、SERS、IR等多种实验技术进行了表征；然后将寡聚核苷酸铈配合物或PNA-配合物与磁性纳米粒子连接构成磁性纳米人工内切酶；用HPLC、电泳、质谱多种实验技术研究磁性纳米人工内切酶DNA磷酸二酯建的定位切断；探讨键合在纳米颗粒上的人工内切酶和靶标DNA杂交，对靶标DNA的定位切断规律。同时又开展了下列拓展性研究：磁性纳米粒子界面上聚合酶链反应的研究，系统研究了纳米粒子界面上聚合酶链反应的规律，建立了纳米粒子界面上PCR技术。利用连接在磁性纳米粒子上的Oligo(dT)，构建了磁性纳米mRNA分离系统。制成了mRNA分离试剂盒，用于多个细胞或单个细胞中mRNA的分离，用分离后的mRNA进行RT-PCR取得了理想的效果。开展磁性纳米人工内切酶及相关的研究，不仅有重要的理论意义，而且在分子生物学、基因工程、疾病的诊断和治疗等邻域具有广泛的应用。