[01202042]纳豆激酶的小试发酵生产及纯化工艺研究

①课题来源与背景 本研究于2012年1月受吉林省教育厅“十二五”科学计划研究项目资助,于2015年11月顺利结题,发表科研论文2篇。 随着生活水平的提高,人类寿命逐渐延长,但血栓栓塞性疾病的发病率也有逐年上升的趋势。目前临床上使用的治疗心脑血管栓塞的药品（链激酶,尿激酶,t-PA等）均在不同程度上存在一定的缺陷,纳豆激酶是纳豆在发酵过程中由纳豆菌产生的一种丝氨酸蛋白酶,在体内外都具有明显的溶解血栓活性,具有可开发成为保健食品与溶栓药物的应用前景。 ②技术原理及性能指标 本研究分离得到一株纳豆激酶高产菌株,并鉴定为枯草芽孢杆菌。测定的所筛选菌株的初始酶活性为467.18U/mL。对该菌株的液体发酵工艺与分离纯化工艺进行优化后,得到了纯度较高的纳豆激酶,最终比活达到了13849.9 IU.mg-1。大鼠体内溶栓检测表明,纳豆激酶处理组与单纯血栓组相比较,血栓湿质量与血栓干质量均明显降低,高剂量纳豆激酶组与低剂量纳豆激酶组血栓湿质量均轻于尿激酶组,表明纳豆激酶可以显著抑制大鼠血栓的生成。 ③技术的创造性与先进性 目前临床上使用的治疗心脑血管栓塞的药品（链激酶,尿激酶,t-PA等）均在不同程度上存在一定的缺陷,或者毒性较强,副作用大,易造成严重的出血反应,尤其是颅内出血的危险很大;或者体内半衰期短,难以发挥药效;或者来源紧张,价格昂贵。跟传统的溶栓剂相比较,纳豆激酶来自食品,安全性高,价格低廉,可以克服上述溶栓药物诸多缺点,且本研究所获得的纳豆激酶活力与纯度均较高,作为抗血栓药物和保健产品的前景十分广阔。 ④技术的成熟程度,适用范围和安全性 本研究为实验室小试研究,其技术成果可为纳豆激酶作为新型溶栓药物的工业化生产和临床使用提供了科学依据和前期基础,有助于解决目前溶栓药物的副作用大、半衰期短和价格昂贵等多种问题。 ⑤应用情况及存在的问题 本研究成果目前未进行应用,由于研究仍处于实验室小试研究阶段,今后将开展发酵罐放大试验与自动化纯化工艺等面向实际生产的研究。 ⑥历年获奖情况 本研究成果目前未获奖。