[01188344]蛋白质组学中整体固定化酶微反应器的研制
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技术详细介绍
研究内容：使用新方法制备了整体微型酶反应器,并将其用于标准蛋白质的酶解以检验其性能。方法：在500μm内径毛细管内,以乙烯基三甲氧基硅烷处理毛细管内壁形成端基烯键,然后将含有一定比例的HEMA、EDMA、环己醇、正葵醇和AIBN混合溶液灌入,聚合反应后制备出整体毛细管柱,然后使用高碘酸钠溶液氧化,固定胰蛋白酶后得整体微型酶反应器。将该酶反应器用于Myo和Cytochrome c标准蛋白的酶解,使用MALDI-TOF MS鉴定酶解的肽段,测试其序列覆盖率以检验将该酶反应器的性能。 采用原位合成法简单快捷地制作了HEMA-EDMA微型整体柱型的固定化酶反应器。在24s内,该酶反应器实现了肌红蛋白和细胞色素c的酶解,序列覆盖率分别达到65%和79%。此结果说明,该酶反应器可以快速并比较完全的对蛋白质进行酶解,完全可以将其用于蛋白质组学中生物样品的酶解。