技术详细介绍
黄毛耳草所含化学成分复杂,具有多种生物活性。目前,国内外文献报道的关于三萜类及黄酮类化合物的有多种分离纯化方法,比较常用的有以下几种:柱层析法、薄层层析、高效逆流色谱法、大孔树脂吸附法、双水相萃取法和毛细管电泳法等。但诸多的分离纯化方法都存在一定不足,有效部位的分离手段仍显缺乏,分离富集效率低,比如黄酮类化合物的类型虽然多样,但大部分是由一个基本结构母核2-苯色酮衍生而来的,在结构上具有很大的相似性。因此,采用常规的分离方法将这些结构相似的化合物分离出来,不仅难度大,而且富集效率低。 分子印迹技术由于其操作简单、可重复利用,具有特异性选择吸附能力等优点,目前被广泛应用于天然活性产物的分离纯化。经文献查阅,利用分子印迹技术提取黄毛耳草中活性成分尚未见报道。目前,分子印迹聚合物(MIP)的识别位点大多通过静电引力、氢键、范德华力等非共价作用,MIP需在非水的弱极性有机溶剂中制备,分子印迹技术存在印迹聚合物稳定性差、耗费有机溶剂多及毒性大等不足。金属配位键强度高于氢键及范德华力,且本身具有方向性,有利于制备结构稳定且选择性高的MIP,且通过金属配位作用结合的识别过程接近于天然分子识别系统,具有结合快速且可逆的优点,弥补了共价作用的不足。另外,金属配伍作用可以存在于极性体系中,这使得在水及醇体系中制备印迹聚合物成为可能,是一种非常适合于分子印迹过程的作用方式。基于以上分析,本研究以三萜类物质乌索酸为目标分子,通过考察功能单体、交联剂、致孔剂等条件制备乌索酸分子印迹聚合物,并结合固相萃取技术,用于黄毛耳草中乌索酸的分离和富集;芦丁可以与多种金属离子形成稳定的配合物,本研究将研究制备芦丁-铜(Ⅱ)金属离子配位分子印迹聚合物,探讨芦丁-铜(Ⅱ)配位分子印迹聚合物的结合性能,为中药中芦丁有效成分的分离富集提供技术支持。 以乌索酸分子印迹聚合物为填料对黄毛耳草中乌索酸进行固相萃取是本研究的创新点,在之前的可查阅文献报道中尚未发现有此类研究,研究将为黄毛耳草有效成分的分离提取提供重要技术支持。在极性溶剂中制备芦丁-铜(Ⅱ)配位分子印迹聚合物是本研究的另一创新点。金属配位分子印迹聚合物具有一般印迹聚合物无法比拟的优势,相比氢键结合作用,功能单体与模板分子的结合更牢固,稳定性更强,同时,金属配位键在极性溶剂中可保持稳定,可有效克服印迹聚合物只能在弱极性溶剂中制备的不足,减少有机溶剂的使用,为中药活性成分的提取开辟新的途径。
黄毛耳草所含化学成分复杂,具有多种生物活性。目前,国内外文献报道的关于三萜类及黄酮类化合物的有多种分离纯化方法,比较常用的有以下几种:柱层析法、薄层层析、高效逆流色谱法、大孔树脂吸附法、双水相萃取法和毛细管电泳法等。但诸多的分离纯化方法都存在一定不足,有效部位的分离手段仍显缺乏,分离富集效率低,比如黄酮类化合物的类型虽然多样,但大部分是由一个基本结构母核2-苯色酮衍生而来的,在结构上具有很大的相似性。因此,采用常规的分离方法将这些结构相似的化合物分离出来,不仅难度大,而且富集效率低。 分子印迹技术由于其操作简单、可重复利用,具有特异性选择吸附能力等优点,目前被广泛应用于天然活性产物的分离纯化。经文献查阅,利用分子印迹技术提取黄毛耳草中活性成分尚未见报道。目前,分子印迹聚合物(MIP)的识别位点大多通过静电引力、氢键、范德华力等非共价作用,MIP需在非水的弱极性有机溶剂中制备,分子印迹技术存在印迹聚合物稳定性差、耗费有机溶剂多及毒性大等不足。金属配位键强度高于氢键及范德华力,且本身具有方向性,有利于制备结构稳定且选择性高的MIP,且通过金属配位作用结合的识别过程接近于天然分子识别系统,具有结合快速且可逆的优点,弥补了共价作用的不足。另外,金属配伍作用可以存在于极性体系中,这使得在水及醇体系中制备印迹聚合物成为可能,是一种非常适合于分子印迹过程的作用方式。基于以上分析,本研究以三萜类物质乌索酸为目标分子,通过考察功能单体、交联剂、致孔剂等条件制备乌索酸分子印迹聚合物,并结合固相萃取技术,用于黄毛耳草中乌索酸的分离和富集;芦丁可以与多种金属离子形成稳定的配合物,本研究将研究制备芦丁-铜(Ⅱ)金属离子配位分子印迹聚合物,探讨芦丁-铜(Ⅱ)配位分子印迹聚合物的结合性能,为中药中芦丁有效成分的分离富集提供技术支持。 以乌索酸分子印迹聚合物为填料对黄毛耳草中乌索酸进行固相萃取是本研究的创新点,在之前的可查阅文献报道中尚未发现有此类研究,研究将为黄毛耳草有效成分的分离提取提供重要技术支持。在极性溶剂中制备芦丁-铜(Ⅱ)配位分子印迹聚合物是本研究的另一创新点。金属配位分子印迹聚合物具有一般印迹聚合物无法比拟的优势,相比氢键结合作用,功能单体与模板分子的结合更牢固,稳定性更强,同时,金属配位键在极性溶剂中可保持稳定,可有效克服印迹聚合物只能在弱极性溶剂中制备的不足,减少有机溶剂的使用,为中药活性成分的提取开辟新的途径。