[01183474]中国家蚕抗菌肽CM4分子结构、基因重组及制备技术

该研究属于动物生物化学领域，张双全教授领导的研究小组是国内最早开展抗菌肽研究的课题组之一，从1984年起，就着重于中国家蚕的抗菌肽的研究，并先后获得了2项国家自然科学基金（编号：39770117、39670116）资助。　　该研究小组建立了一整套完善体系：从家蚕蛹中诱导获得天然抗菌肽CM4及基因重组方法获得重组CM4，分离纯化及鉴定等一系列分析技术。八十年代初，采用离子交换，疏水层析等方法从中国家蚕蛹中分离到6种不同活性组分的抗菌肽，并对活性强的组分4（CM4）进行了深入研究；测定了抗菌肽CM4组分的一、二级分子结构及其基因结构，为其基因工程重组表达及功能的研究奠定了基础；并成功地对其基因序列进行了改造，以提高其抗菌活性。九十年代后期至今，为了获得重组抗菌肽CM4，科研小组利用各种表达系统进行实验：融合蛋白在原核表达，5～10L高密度发酵，亲和纯化，蛋白酶切去除融合标签，抗菌活性鉴定。CM4基因亚克隆到酵母表达载体，分泌表达，5～10L高密度发酵，分子筛纯化获得抗菌肽CM4，抗菌活性鉴定。　　成功用两种蛋白表达系统获得重组抗菌肽CM4，完善了重组抗菌肽CM4的生产纯化及制备工艺，并制定了质量标准；培养博士研究生3名，培养硕士研究生8名。成果在国内外发表23篇论文，其中SCI收录3篇，被引用次数11次；EI收录1篇；中国学术期刊出版总库收录19篇，被引用次数共计157次；中国学术期刊出版总库引用79次，中国博士学位论文库引用25次；优秀硕士学位论文库引用52次；中国重要会议论文库引用1次。获得国家授权发明专利一项(专利号：ZL2005 10037601.0)；出版论文专集1本；1999年获世界华人重大学术成果奖；2000年在国家“211工程”一期建设验收中被评为标志性成果。这些研究为抗菌肽的产业化提供坚实的理论依据。