[01180994]高产茁霉多糖菌种的选育及其生产工艺研究

本项目以普通玉米淀粉糖为原料,采用基因工程技术和基因组改组技术构建了高产无色素茁霉多糖生产菌株。采用生物统计优化技术方法,确定了出芽短梗霉发酵生产茁霉多糖的最佳条件,建立发酵生产工艺。 本项目以出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）（CGMCC NO.140334）为出发菌株,先使用紫外线和亚硝基胍进行前期诱变,诱变出无色素菌株,之后运用基因工程的方法克隆出控制茁霉多糖产量的焦磷酸化酶（UDPGase）,构建表达载体转化到出芽短梗霉低色素突变菌株中,以达到获得低色素高茁霉多糖产量的菌株。对突变菌株进行基因组改组,通过高糖平板筛选获得菌株F41、F42,多糖产量分别为44.83g/L、45.18g/L,较出发株分别提高102.85%、104.43%;菌株经6次传代培养,茁霉多糖产量稳定,F4l、F42是性状较稳定的优良菌株。采用生物统计优化技术对F42菌株进行发酵工艺优化,获得其最佳发酵工艺,产量达60.5g/L,转化率达66.1%。采用酒精沉淀方法进行粗提,产品纯度达85.7%。