[01151621]内置LTB幽门螺杆菌UreB-HpaA两价口服基因工程疫苗的实验研究

幽门螺杆菌感染可引起胃炎、消化道溃疡，且与胃癌发病直接相关。人类对幽门螺杆菌易感，各国家人群中感染率均高达50%以上。药物治疗幽门螺杆菌感染有良好疗效，但存在停药后再感染、诱导耐药、药物副作用等问题。接种疫苗是预防和控制感染性疾病最为有效和经济的措施。由于特殊原因，基因工程疫苗是目前唯一可行的幽门螺杆菌疫苗研发途径，但至今尚无相关产品。在浙江省科技计划立项资助及本省相关企业资金支持下，我们于2000.09～2005.12进行了内置佐剂幽门螺杆菌两价口服基因工程疫苗的研究工作。该项目的主要成果有：⑴发现存在较高的不同基因型幽门螺杆菌混合感染率；⑵构建了7个幽门螺杆菌基因、3个多肽佐剂基因原核表达系统，并分别证实并了重组表达产物各自的相关功能；⑶沙鼠和小鼠模型幽门螺杆菌感染率均为100%；⑷获得了感染者血清中幽门螺杆菌主要表面抗原抗体水平；⑸选择了LTB为佐剂、UreB和HpaA为抗原，构建了人工融合基因ltB-ureB-hpaA及其原核表达系统，重组rLTB-UreB-HpaA仍分别保持佐剂活性、抗原性和免疫反应性；⑹rLTB-UreB-HpaA口服免疫后免疫保护率可达100%，rUreB和rHpaA 特异性S-IgA阳性率分别为100%和91.7%。该项目首先发现并报道我国人群中约有1/3的同一个体中存在多重不同基因型幽门螺杆菌菌株的混合感染；首先证实并报道HpaA是自然表达量和免疫原性仅次于UreB、感染者血清中有高比列和高水平抗体、不同幽门螺杆菌菌株普遍携带且序列保守的幽门螺杆菌表面蛋白抗原；国际上首先成功地构建了ltB-ureB-hapA人工融合基因及其表达系统，并经实验证明LTB-UreB-HapA大分子中的LTB仍能保持原有效果的佐剂活性、LTB和UreB仍能保持各自独立的免疫原性；首先证实rLTB-UreB-HapA疫苗有很强的免疫保护作用；首先证实并报道了LTKA63主要通过Th2途径增强机体对抗原的免疫应答。该项目发表SCI论文4篇、IM论文9篇、中华系列杂志及浙大学报论文8篇、其他英文论文2篇，主编了人卫出版社出版的专著《钩端螺旋体病学》，申报国家发明专利1项并通过初审。该项目属于新型疫苗临床前研究，有十分明确和广阔的应用前景。