[01148967]海洋中药海龙的抗肿瘤活性蛋白类成分及作用研究

中药中的蛋白/多肽类成分研究欠缺，尤其是动物类中药。本课题首次建立了刁海龙、拟海龙、尖海龙和粗吻海龙的HPLC蛋白指纹图谱。指纹图谱结合体外抗肿瘤筛选法，对4种药用海龙抗肿瘤作用物质基础进行了研究，发现共有蛋白Hailongin为海龙类药材抗肿瘤的活性成分，具有明显的体内、体外活性，对Lovo、A549、CCRF-CEM、Hela等细胞株及小鼠S180实体瘤的生长均有明显抑制作用；该蛋白与常用化疗药物具有协同作用，能明显增强甲氨喋呤的细胞毒作用。理化性质分析表明该蛋白为酸性蛋白，分子量为55.0 kDa，等电点为6.2；氨基酸序列分析显示该蛋白为一新蛋白，与已知蛋白无明显同源性。对Hailongin抗肿瘤作用机理进行了探讨，发现其明显诱导肿瘤细胞的凋亡，同时还能显著增强荷瘤小鼠的免疫功能。建立了Hailongin的规模制备的工艺。此外，对海龙的小分子成分进行了分析，建立了海龙药材的HPLC指纹图谱以及3种核苷类成分的HPLC测定方法；对其脂溶性成分进行了研究，首次从粗吻海龙中分离鉴定了11个化合物，其中1个为新天然产物。上述研究为海龙的临床应用、质量控制以及进一步开发提供了科学依据。