[01136298]简化模板制备方法--改进聚合酶链式反应诊断人体隐孢子虫病技术研究
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技术详细介绍
根据LMA等克隆的隐孢子虫核酸序列设计并合成一对引物,将含有隐孢子虫卵囊的粪便经浓集、裂解后,直接取上清液作为模板与引物进行PCR反应。结果显示取自于桂林、福州和徐州3地含有隐孢子虫的粪便标本均能扩增出418bp的隐孢子虫的DNA条带,阴性对照无扩增。结果表明应用该引物对人粪便中的隐孢子虫进行PCR检测具有高度特异性和灵敏性。该模板制备方法能缩短PCR检测隐孢子虫时间,较适于临床应用。同时首次报告了一种固定、漂浮和洗涤后隐孢子虫的检测方法。