[01133294]ACC 合成酶反义基因转化枣树的研究

枣树是我国特有的重要经济林木。枣树生产上长期依靠无性繁殖，且杂交育种难度极大，使得其品种改良工作进展十分缓慢，必须采基因工程技术加快其育种进程。另外，枣成熟期短而集中，又极不耐贮运，产区常常出现成批鲜果腐烂。因此，建立枣树遗传转化系统，利用转基因技术进行耐贮品种的培育具有重要意义。我们以鲜食品种“鸡蛋枣”、“茶陵沙枣”为材料，通过根癌农杆菌介导ACC 合成酶反义基因转化，得到了转基因植株。实验表明，预培养1-2d 的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d，转移至分化选择培养基上诱导产生抗Km 不定芽，将该不定芽先后在15 mg/L Km 的生长、增殖和生根培养基上继续选择，先后获得28 株抗km 再生植株。对其中9 株进行Southern 杂交证实有6 株外源基因已整合到了枣树基因组中。Real time PCR 定量检测表明，ACC 合成酶反义基因在5 株转基因植株中得到了表达。枣树转化系统的建立对今后开展枣树基因工程研究有着重要的参考价值，所获得的带有ACC 合成酶反义基因的转基因植株为耐贮枣树品种的育成提供了重要的材料。