[01129605]一种奶牛早期妊娠阶段血清中的差异蛋白及其用途

奶牛繁殖性能的好坏,不仅影响奶牛数量的增加和质量的提高,还影响奶牛的生产性能和经济效益,因此,奶牛的妊娠率受到各国奶牛业的广泛重视。目前的统计结果显示,尽管奶牛的受精率达90%,但是平均产犊率只有40%～55%,约70%～80%的胚胎/胎儿损失发生在妊娠前3周,其中14～18天母体妊娠识别时期的早期胚胎丢失为主。因此,尽早对人工授精后的奶牛进行妊娠诊断,及时分辨妊娠奶牛和空怀奶牛,对妊娠奶牛进行有效监控,防止胚胎损失;对空怀奶牛实施同期发情和再次人工授精,可提高牛群的妊娠率和繁殖效率。 目前,通常采用直肠检查和ELISA试剂盒诊断奶牛是否妊娠,直肠触诊法是通过实践经验丰富的工作人员触摸奶牛直肠,劳动强度较大、工作效率较低,难以在奶牛妊娠早期进行诊断,容易造成奶牛的产犊间隔延长、繁殖率降低、产奶量减少,增加了饲养管理的成本,降低了奶牛养殖的经济效益。采用直肠触诊法进行诊断时,最早可于奶牛人工授精后35天进行诊断,而且容易触及子宫和胎膜,对早期胚胎造成伤害,甚至导致母牛直肠组织破坏。ELISA（酶联免疫吸附实验）试剂盒是通过判断奶牛血清中的PAG（妊娠相关糖蛋白）含量,进而判断受精28天以上的奶牛是否妊娠,不能准确判断奶牛受精后一个情期内（21天）是否妊娠,进而难以排查受精后14～18天的奶牛是否为空怀奶牛。 专利号为201410294733.0的发明专利申请提供了一种基于BRCA2蛋白、mRNA诊断奶牛是否妊娠的方法及用途,该方法根据BRCA2蛋白在妊娠奶牛和空怀奶牛体内的差异,判断奶牛是否妊娠,该方法只能在奶牛人工授精后18天进行早期妊娠诊断,而且由于该蛋白在妊娠早期阶段的表达趋势并不一致,能否用于奶牛早期胚胎丢失的预警也尚无界定。 针对现有技术中存在的缺陷,本技术提供一种奶牛早期妊娠阶段血清中的差异蛋白,所述差异蛋白为妊娠差异蛋白、空怀差异蛋白和反向差异蛋白,妊娠差异蛋白包括ARHGAP42、EFEMP1、GTF2F1、LOXL2、CPB2、LYST、RDH11、TRABD、TRIM67和TRMT112,空怀差异蛋白包括IGL,反向差异蛋白包括HBB和HP;差异蛋白用于判断奶牛是否妊娠、是否存在早期胚胎丢失或提高胚胎存活率。本发明能够判断受精后的奶牛是否妊娠或者空怀,及时对空怀奶牛实施同期发情和再次人工授精,并且能够进行早期胚胎丢失预警、制备保胎素,全面能够提高牛群的妊娠率和繁殖效率。 本技术能够准确判断奶牛是否为空怀奶牛,便于工作人员及时对空怀奶牛实施同期发情和再次人工授精,能够提高牛群的妊娠率和繁殖效率。 也能够通过检测奶牛体内妊娠差异蛋白或/和反向差异蛋白的含量,判断妊娠奶牛是否存在胚胎丢失的风险,方法比较简单,结果比较准确。同时本技术将妊娠奶牛血清中持续上调的蛋白作为保胎素原料,为奶牛妊娠早期保胎素生物制品的研发提供了蛋白资源,能够有效促进妊娠的维持,减低妊娠识别时期胚胎丢失的风险。 本技术成果在湖北省及武汉市的相关奶牛场进行了自行转化,检测样本只需少量血液,不存在安全问题。