[01129258]一种猪血红蛋白综合利用的方法

①课题来源与背景 本技术来源学校自选项目。 猪血红蛋白是结合血红素辅基、具有四级结构的珠蛋白,由四个亚基组成。四个亚基包含2个相同的α链和2个相同的β链。血红素是制备胆红素、人工牛磺的重要原料,是治疗缺铁性贫血和癌症药物的重要中间体,市场需求较大。猪血红蛋白四聚体的分子结构致密,直接食用不易消化吸收,热喷雾干燥促使血红蛋白分子结构更加紧密,更加不利于消化和吸收。因此,体外酶切降解血红蛋白,即可除腥,增加适口性,又可提高生物利用度,增加营养价值。因此,本发明将针对上述问题提出一种新型血红蛋白综合利用方法,不使用有机溶剂,简化工艺,降低成本,不产生任何废弃物,血红素和多肽分离彻底,产品得率高、纯度高,工业化应用前景广阔。 ②技术原理及性能指标 为了解决上述问题,本发明提供一种综合利用猪血红蛋白的方法,先酶解完整的血红蛋白,加热并在碱性溶液中使用一定浓度的盐处理酶解液,促使血红素和多肽解离,再使用超滤、纳滤方法分离血红素和多肽及小肽,最终达到综合利用猪血红蛋白目的。 所述技术方案具体如下： 1、新鲜猪血加入柠檬酸三钠抗凝,分离血红细胞,血红细胞使用生理盐水洗涤; 2、将所得的血红细胞加入蒸馏水,不断搅拌溶血、离心,取上清用作血红蛋白液; 3、血红蛋白液加入食品级蛋白酶酶解,酶添加量、温度、时间、pH均根据不同的酶选择其最优值; 4、酶解液用浓氨水或NaOH,加热,并加入NaCl充分搅拌,促使血红素与多肽、小肽彻底分离并灭酶活,冷却至室温后离心,使用超滤系统处理上清液分离血红素、小肽和多肽。 5、血红蛋白酶解多肽存在超滤截留液中,用盐酸,使用纳滤系统脱盐并浓缩至适当体积,冷冻干燥既得多肽产品; 6、超滤滤出液中含有血红素、小肽、氨基酸、其它小分子有机物、无机物等。浓缩超滤滤出液至血红素开始析出,过滤除去不溶性杂质,再以盐酸,血红素重新沉淀析出。过滤收集沉淀,再使用相同的加碱调酸方法处理沉淀以纯化血红素分别用双蒸水和无水乙醇洗涤血红素沉淀,干燥即得血红素纯品; 7、收集、合并过滤后的酸化滤液,调pH,纳滤脱盐并浓缩至适当体积,冷冻干燥即得小肽产品。 ③技术的创造性与先进性 1、本发明使用NaCl破坏珠蛋白和吡咯分子间的配位键,促使血红素与多肽、小肽彻底分离,未引入丙酮等有机溶剂,避免了后续多肽类物质收集过程中去除有机溶剂的步骤,简化了工艺; 2、整个工艺过程不使用有机溶剂,产品无有机溶剂残留,此外,工艺中虽有反复加碱调酸步骤,但通过血红素结晶即可实现血红素与酸、盐的分离,酸化废液用NaOH中和成NaCl后可回收再利用,对环境无排放; 3、采用本发明所述工艺综合利用猪血红蛋白,经济效益显著,社会、环保价值高,产品得率高,纯度高,收集得到的血红素纯度达到90%以上,小肽、多肽纯度达到80%。 ④技术的成熟程度,适用范围和安全性 上述方法不使用有机溶剂,简化工艺,降低成本,不产生任何废弃物,血红素和多肽、小肽分离彻底,产品得率高、纯度高,工业化应用前景广阔。本技术明属于食品加工技术领域,特别涉及一种猪血红蛋白综合利用的方法。 ⑤应用情况 期待技术转让。