[01114082]利用Red/ET DNA重组工程改造蛋白酶体抑制剂syrbactins生物合成途径开发抗肿瘤药物

目前抗癌药物研发刻不容缓。蛋白酶体是抗肿瘤药物筛选的分子靶标。本项目针对蛋白酶体抑制剂家族syrbactins生物合成途径进行了宿主选择优化、理性设计构建人工的生物合成途径,异源表达和筛选抗肿瘤药物先导分子：完成了syrbactins家族基因簇资源的进一步挖掘,新发现的基因簇需要异源表达来鉴定;完成了包括大肠杆菌、假单胞菌、伯克氏菌等几种宿主细胞的改造,提升它们作为次生代谢产物异源表达宿主的潜力;为进行syr bact i ns家族组合生物合成研究,在不同宿主中尝试表达不同syrbactins基因簇,发现有两株大肠杆菌（Nissle 1917and GB05- Mt aA） 可成功表达两种不同syrbactins基因簇,白色链霉菌和天蓝色链霉菌也有希望会成为syrbactins基因簇表达的比较好的宿主;优化Red/ ET同源重组系统提升其重组效率（ 新系统命名为ExoCET） ,利用此技术,对syrbactins家族化合物开展基因簇间的基因及结构域模块的替换和点突变等研究,发现负责非核糖体肽和聚酮部分的生物合成的基因或结构域替换或点突变未能获得预期结构化合物的表达,但其脂肪酸链的模块替换和点突变则有效改变了syr bactins家族中glidobactin脂肪酸链的长度、饱和度等结构特性,因此获得系列新的衍生物,且具有一定抗肿瘤生物学活性。本项目执行期间发表相关论文9篇,申请相关发明专利3项,获得教育部科技奖励二等奖1项。