[01084443]海洋产几丁质酶菌株筛选及其几丁质酶研究
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调味及发酵
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非专利
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技术详细介绍
几丁质酶能将几丁质水解成N-乙酰氨基葡萄糖,在抑制真菌的生长发育、植物抗真菌感染和几丁质的开发利用中具有良好的应用前景,因而受到人们的广泛关注。为了提高微生物菌株产几丁质酶的能力,首先筛选出产酶活力高、稳定、产酶条件低、潜力大等具有多种优良特性的菌株,然后优化微生物产几丁质酶的外部条件。不同来源的几丁质酶差异较大,因而探索利用不同来源内切和外切几丁质酶的配合,可能对于其活性有协同作用。优化几丁质酶分离纯化的方法,不仅有利于进一步阐明该酶作用机制,也有利于开发几丁质酶的潜在应用价值。该研究从唐山港海泥中获得高产几丁质酶的短芽孢杆菌属菌株Bacillusbrevissp,命名为Bsp1。优化了其产酶条件,培养基碳源以胶体几丁质最好;产几丁质酶的最适温度在32℃;pH在7.0~8.0;蛋白胨和酵母粉对产酶的效果明显。在对不同来源菌株组合发酵研究发现,几丁质酶活力可达到0.47U/mL。经过SDS-PAGE电泳测定该酶的分子量为23ku,其比活力为86.65,纯化倍数为:1.707,产率为:32.1%,表明一步法纯化可以达到快速简便分离几丁质酶的目的。证明了纯化的几丁质酶能抑制真菌的生长,其对病原真菌的抑制作用具有广谱性。不同来源的酶具有协同作用,可增强酶活性。分离的几丁质酶在pH7.5,55.0℃左右具有最大酶活性,Zn<'<'2+>>、Cu<'<'2+>>和Hg<'<'2+>>能强烈抑制几丁质酶活性,Ni^+和EDTA抑制20~40%,5mMCo<'<'2+>>可以使几丁质酶活性提高1.4倍。该项目的研究成果对于几丁质酶的生产,固体几丁质类废弃物的回收利用及抗病原真菌药物筛选等方面预计将有较好的应用前景。
几丁质酶能将几丁质水解成N-乙酰氨基葡萄糖,在抑制真菌的生长发育、植物抗真菌感染和几丁质的开发利用中具有良好的应用前景,因而受到人们的广泛关注。为了提高微生物菌株产几丁质酶的能力,首先筛选出产酶活力高、稳定、产酶条件低、潜力大等具有多种优良特性的菌株,然后优化微生物产几丁质酶的外部条件。不同来源的几丁质酶差异较大,因而探索利用不同来源内切和外切几丁质酶的配合,可能对于其活性有协同作用。优化几丁质酶分离纯化的方法,不仅有利于进一步阐明该酶作用机制,也有利于开发几丁质酶的潜在应用价值。该研究从唐山港海泥中获得高产几丁质酶的短芽孢杆菌属菌株Bacillusbrevissp,命名为Bsp1。优化了其产酶条件,培养基碳源以胶体几丁质最好;产几丁质酶的最适温度在32℃;pH在7.0~8.0;蛋白胨和酵母粉对产酶的效果明显。在对不同来源菌株组合发酵研究发现,几丁质酶活力可达到0.47U/mL。经过SDS-PAGE电泳测定该酶的分子量为23ku,其比活力为86.65,纯化倍数为:1.707,产率为:32.1%,表明一步法纯化可以达到快速简便分离几丁质酶的目的。证明了纯化的几丁质酶能抑制真菌的生长,其对病原真菌的抑制作用具有广谱性。不同来源的酶具有协同作用,可增强酶活性。分离的几丁质酶在pH7.5,55.0℃左右具有最大酶活性,Zn<'<'2+>>、Cu<'<'2+>>和Hg<'<'2+>>能强烈抑制几丁质酶活性,Ni^+和EDTA抑制20~40%,5mMCo<'<'2+>>可以使几丁质酶活性提高1.4倍。该项目的研究成果对于几丁质酶的生产,固体几丁质类废弃物的回收利用及抗病原真菌药物筛选等方面预计将有较好的应用前景。